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  • D-熒光素鉀鹽(熒光探針與細胞染色)
  • 型號:FS1231
  • 報價:6800
  • 地區:上海市
  • 0
  • D-熒光素鉀鹽(熒光探針與細胞染色),D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素(鉀鹽 );Luc reporter gene 報告基因;In vivo imaging 活體成像研究;轉錄水平研究;熒光素酶/ATP水平研究;報告基因質粒;報告基yin病毒顆粒;螢火蟲熒光素;甲蟲熒光素;CAS:115144-35-9。
  • 025-58690567
產品詳細介紹

D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素(鉀鹽 )

產品信息

產品貨號產品名稱規格  價格(元)
FS1231-100MGD-Luciferin, Potassium Salt  D-熒光素(鉀鹽 )100mg1200.00 
FS1231-500MGD-Luciferin, Potassium Salt  D-熒光素(鉀鹽 )500mg3600.00 
FS1231-1GD-Luciferin, Potassium Salt  D-熒光素(鉀鹽 )1g6800.00 
FS1231-5GD-Luciferin, Potassium Salt  D-熒光素(鉀鹽 )5×1g24000.00 
FS1231-10GD-Luciferin, Potassium Salt  D-熒光素(鉀鹽 )10×1g39800.00 

D-熒光素鉀鹽(熒光探針與細胞染色)D-熒光素鉀鹽(熒光探針與細胞染色)

 

產品描述

D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個生物技術領域,特別是體內活體成像技術。作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,D-熒光素(底物)被氧化發光。當熒光素過量時,產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性(見下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質粒轉染進入細胞后,導入研究動物如大小鼠體內,之后注入熒光素,通過生物發光成像技術(BLI)來檢測光強度變化,從而實時監測ji病發展狀態或yao物的zhi療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響,根據生物發光強度的變化來指示能量或生命體征。

產品應用

D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。

常見商業化類型的差異(熒光素鉀,鈉,游離酸):

目前市場上有三種產品形式,D-熒光素(游離酸),D-熒光素(鈉鹽),和D-熒光素(鉀鹽)。這三種產品主要差別在于溶解特性。

1)D-熒光素(游離酸)在水以及緩沖體系內的溶解性都很弱,除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-熒光素(鈉鹽)和D-熒光素(鉀鹽)能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內實驗。配成溶液后的三種產品,在絕大多數應用上都沒有實質性的差別。

3)D-熒光素(鈉鹽)和D-熒光素(鉀鹽)基本上沒有差別,主要是使用習慣等因素影響。整體來看,鉀鹽的應用文獻明顯多于鈉鹽。

產品屬性

CAS :115144-35-9

化學名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

分子式:C11H7N2O3S2K

分子量:318.42 g/mol

純度:>99% (HPLC),分子生物學級(超純)

外觀:淺黃色至黃色粉末

溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法

A.體外生物發光檢測

1)儲存液制備

用蒸餾水溶解D-熒光素(鉀鹽),配制成15mg/ml的儲存液(100×),混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存,避免反復凍融。建議使用的工作液濃度為150µg/ml(相當于468µM)。

2)熒光素酶反應緩沖液制備

配方【1×,參考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具體緩沖液組成可參考其他文獻資料來調整。按照以上配方制備熒光素酶反應緩沖液(2×)。

3)收集細胞裂解上清(熒光素酶表達)

根據需要檢測的細胞類型,選擇合適的裂解液進行細胞裂解,離心收集上清后續檢測待用。

4)螢火蟲熒光信號檢測

【注①】:螢火蟲熒光信號的檢測方法大體上取決于冷光測定儀(luminometer)類型(是手動型熒光計、單管注射型或者酶標板讀數型熒光計)。根據特定發光測定儀,來考慮注射用量和程序設置。

【注②】:需設置不含熒光素酶的孔(用作陰性對照),以測定背景熒光。

例:注射式冷光測定儀(injectible luminometer,單樣或微孔板,200µl終體積)

a)吸取100µl熒光素酶反應緩沖液(2×)到一干凈的冷光測定儀比色皿或96孔板的各孔(使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔內;

c) 如果有需要,用水來補足使得總體積到198µl;

d)設置程序注射2µl熒光素儲存液(使工作濃度150µg/ml),程序:2~5秒延遲(delay),之后10s測定。

B.活體成像分析

1)用無菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-熒光素(鉀鹽)工作液(15mg/ml),0.2µm濾膜過濾chu菌?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b于-20℃或-80℃凍存,避免反復凍融。一旦使用,放到4℃解凍,保持冰冷且避光。

2)注射量取決于注射方式,具體如下:

注射方式

劑量

靜脈注射(25-27 gauge針頭)    

按10µl/g體重濃度,加入相應體積的15mg/ml熒光素工作液    

腹腔注射(25-27 gauge針頭)

按10µl/g體重濃度,加入相應體積的15mg/ml熒光素工作液

肌肉注射(27 gauge針頭)

50µl,濃度為1-2mg/ml熒光素工作液

鼻內注射(pipette)

50µl,濃度為3mg/ml熒光素工作液

3)注射入體內10-20 min(待光信號達到zui強穩定平臺期),再進行成像分析。

注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定zui高信號檢測時間和信號平臺期。

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