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  • 有了它,你就可以放心大膽的使用細胞膜熒光探針
  • 點擊次數:184 發布時間:2021-08-26
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  •    細胞膜熒光探針是一種親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構進入細胞膜后,本產品在整個細胞膜上擴散,最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,細胞膜熒光探針被激發后可以發出綠色的熒光,具有很高的淬滅常數和激發態壽命??梢杂脴藴实?FITC濾光片檢測。
     
      細胞膜熒光探針通常不會明顯影響細胞的生存力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑。除了簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
     
      細胞膜熒光探針的使用方法:
      1、染色液制備:
      a、配置DMSO或EtOH 儲存液:儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1~5 mM。
      b、工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5 μM的工作液。
      
      2、懸浮細胞染色:
      a、懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。
      b、在37 ℃培養細胞2~20分鐘,不同的細胞最佳培養時間不同。
      c、染色細胞試管在1000~1500轉離心5分鐘。
      d、傾倒上清液,再次緩慢加入預溫37℃的培養液。
      e、重復c、d步驟兩次以上。
      
      3、粘壁細胞的染色:
      a、使粘壁的細胞在無菌實驗室培養。
      b、從培養基中移走蓋玻片,吸走過量培養液,將蓋玻片放在潮濕的環境中。
      c、在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。
      d、在37 ℃培養細胞 2~20分鐘,不同的細胞最佳培養時間不同。
      e、吸干染料工作液,用培養液洗蓋玻片2~3次,每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞,培養5~10分鐘,然后吸干培養基。
      
      4、流式細胞儀檢測:
      染色的細胞可以分別用經典的FL1,FL2,FL3和FL4流式細胞儀檢測。
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